药学CMC视角丨你的多肽药安全吗？多肽药物亚硝胺风险评估要点解析

自2018年“缬沙坦事件”以来，亚硝胺杂质已成为全球药品监管的核心焦点。值得注意的是，迄今为止，FDA和EMA尚未发现或召回因亚硝胺污染导致的多肽产品。但这并不意味着多肽药物可以豁免亚硝胺控制要求。

恰恰相反，EMA明确表态：合成肽不能豁免于亚硝胺杂质的控制要求。即使采用标准的固相肽合成（SPPS）工艺，亚硝胺污染风险可被视为“极低”，申请人仍必须提供正式的风险评估来证实这一点，而不能仅凭经验默认。

一、多肽药物亚硝胺风险的三大来源

EMA指出，多肽药物的亚硝胺风险主要来自三大潜在途径：

起始物料（氨基酸衍生物等）引入

许多保护氨基酸的合成或纯化过程可能涉及亚硝化试剂（如亚硝酸钠）或仲胺类化合物。如果物料中残留了亚硝酸盐或胺类物质，在后续合成或储存条件下可能形成亚硝胺。针对这一风险，研究者需对高风险供应商或特定结构的氨基酸（如含二级胺侧链的脯氨酸类似物）进行额外的亚硝酸盐/亚硝胺检测。

合成工艺中“原位”形成

SPPS中常用DMF（N,N-二甲基甲酰胺）等溶剂或DIC（二异丙基碳二亚胺）等含胺基的缩合剂。如果工艺中使用亚硝酸钠，或物料中引入亚硝酸根离子，在酸性条件下（如TFA裂解步骤），这些胺类物质会与亚硝酸根离子反应，生成潜在强致癌性的N‑亚硝基化合物。可通过严格控制胺类试剂与亚硝酸盐的接触，优化淬灭步骤设计加以控制。

降解产物的亚硝化

多肽本身或其降解产物中若含有二级胺结构，在遇到亚硝酸根离子时极易反应生成NDSRIs（亚硝胺药物成分相关杂质）。例如，糖肽类抗生素（如万古霉素）由于其二级胺结构，对形成NDSRIs非常敏感。

二、FDA最新指南的补充要求

2024年9月，FDA发布《Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs》（Revision 2），对多肽药物中亚硝胺风险进行了更详细阐述，包括亚硝胺杂质的来源、形成机制、风险评估、控制策略以及可接受摄入量（AI）限值，与EMA指南形成互补。

FDA明确两大风险来源：

FDA特别指出的高风险环节：

叠氮淬灭步骤：使用亚硝酸淬灭过量叠氮化物时，若体系中含胺类物质，会直接生成亚硝胺（FDA强烈建议将淬灭步骤从主反应混合物中分离）

溶剂回收：回收的DMF、NMP、甲苯等若含胺类杂质或亚硝胺，会带入后续工艺

纯化过程中的酸性条件：尤其当存在亚硝酸盐时

制剂中的NDSRI形成：API与辅料中的亚硝酸盐反应，可能在储存过程中持续增长

三、多肽药物亚硝胺控制策略

综合两大机构指南，ag真人平台官方整理出以下应对策略：

首先，遵循ICH M7原则，对API和制剂中亚硝胺的潜在风险进行全面评估（包括多肽链中所有胺基结构、工艺中使用的胺类试剂、溶剂回收、辅料中的亚硝酸盐）

其次，开发高灵敏度检测方法，LOQ需达到AI限值的10%以下；必须检测NDSRIs（不能只测小分子亚硝胺）

最后，及时向监管机构报告工艺变更、规格设定等，包括DMF修订、制剂变更（如添加抗氧化剂、pH调节剂）

特别提醒：FDA明确指出，许多制造商最初只评估了小分子亚硝胺，未考虑NDSRIs。指南要求重新评估NDSRIs，即针对多肽药物及其片段中易发生亚硝化的胺类化合物进行风险评估，并建立相关检测方法。

四、ag真人平台官方的服务能力

华测医药已受多家药企委托，针对氨基酸类、酰胺类等非经典仲胺的胺类化合物进行亚硝化风险评估，能够满足多肽药物中涉及到的起始物料、中间体、缩合剂等易亚硝化胺类化合物的风险评估需求。自华测医药开展亚硝化风险评估及亚硝胺定制合成服务以来，所涉及的项目申报均无负面反馈。

如果您在多肽药物的亚硝胺风险评估、NDSRIs检测方法开发或对照品定制合成方面有任何需求，欢迎联系华测医药。

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