药学CMC视角丨非奈利酮亚硝胺杂质研究：从风险评估到方法学验证

非奈利酮（Finerenone）作为新型非甾体类盐皮质激素受体拮抗剂（MRA），在2型糖尿病相关慢性肾脏病治疗中展现出了独特的肾脏和心血管获益。非奈利酮的化学结构中包含一个1,4-二氢吡啶环，其氮原子具有潜在的亚硝化风险。如何科学地评估这一风险，并建立稳健的检测方法，是保障患者用药安全的关键一环。本文将从风险评估与方法开发验证两个维度，分享ag真人平台官方针对非奈利酮原料药中亚硝胺相关杂质的系统研究思路。

 

一、亚硝胺风险评估

风险评估是整个杂质控制策略的基石。参考既往的地平类药物（具有相似二氢吡啶环结构）评估思路和经验，ag真人平台官方在实验室模拟了多种体外亚硝化条件（如不同pH、不同亚硝化试剂），对非奈利酮原料药进行了严格测试。

 

类仲胺或叔胺	风险分析	潜在的亚硝化杂质
非奈利酮	具有类仲胺结构，有潜在亚硝胺化风险	N-亚硝基非奈利酮

 

高分辨质谱（LC-Q/TOF）分析是这一阶段的核心手段，通过提取理论目标物“N-亚硝基-非奈利酮”（NDSRI）的精确分子离子峰，对目标物的形成可能性进行追踪分析。

 

华测医药配备安捷伦6530 Q-TOF

 

评估的价值在于：明确原料药自身是否存在内源性亚硝化风险。这一结论将直接决定NDSRI是否需要纳入后续方法学控制范畴，避免盲目建方法或漏检风险，为后续研究指明方向。

 

二、亚硝胺相关杂质方法开发与验证

除原料药内源性亚硝化风险外，华测医药还对非奈利酮中可能存在的亚硝胺基因毒杂质做了全面研究，建立了包括NDMA（N-亚硝基二甲胺）、NMBA（N-亚硝基-N-甲基-4-氨基丁酸）等在内的多种亚硝胺杂质的液相色谱-串联质谱联用法，并完成了系统验证。

 

华测医药配备AB Sciex 5500

 

方法开发的关键挑战

•目标杂质物理化性质各异，需优化色谱条件以实现良好保留与分离。限度在PPB级别，对仪器灵敏度提出极高要求。

•NDSRI杂质与主成分结构相似，且易造成假阳性，需通过色谱分离与质谱参数双重优化加以甄别。

华测医药采用三重四级杆-液相色谱质谱联用仪进行检测，通过系统性研究，开发的方法适用于检测非奈利酮中包括NDMA、NMBA在内的多种亚硝胺基因毒性杂质，分析方法类型为杂质定量分析。按照中国药典2025年版四部通则<9101 分析方法验证指导原则>进行方法验证，考察参数包括：专属性、系统适用性、线性/范围、准确度、精密度（重复性/中间精密度）、溶液稳定性、检测限和定量限、耐用性。

 

NDMA定位溶液色谱图

NMBA定位溶液色谱图

 

三、总结

非奈利酮的案例再次验证了亚硝胺杂质研究的科学路径：风险评估先行，方法开发与验证联动。先通过高分辨质谱排查原料药的内源性亚硝化风险，再针对监管要求关注的已知亚硝胺建立高灵敏度LC-MS/MS方法，形成科学、高效且合规的控制策略。华测医药依托专业的合成与质谱技术平台，致力于为客户提供从“潜在风险识别”到“放行方法建立”的一体化亚硝胺解决方案。

 

 四、华测医药项目经验

华测医药已完成近百项亚硝胺风险评估与杂质定制合成项目，覆盖创新药、仿制药（中间体及成品），成功协助客户通过CDE发补及FDA/EMA审计。典型案例如下：

 

序号	品种名称	服务内容
1	巴瑞替尼	亚硝化风险评估 + 亚硝胺定制合成
2	磷酸氯喹	亚硝化风险评估 + 亚硝胺定制合成
3	马酸氯马斯汀	亚硝化风险评估 + 亚硝胺定制合成
4	1类创新药	亚硝化风险评估 + 亚硝胺定制合成
5	愈创木酚磺酸钾	亚硝化风险评估 + 亚硝胺定制合成
6	盐酸乌拉地尔	亚硝化风险评估
7	枸橼酸莫沙比利	亚硝化风险评估
8	磷酸左奥硝唑酯二钠	亚硝化风险评估
9	丁酸氯维地平	亚硝化风险评估
10	盐酸尼卡地平	亚硝化风险评估
11	非奈利酮	亚硝化风险评估
12	头孢克肟	亚硝化风险评估
13	司美格鲁肽	亚硝化风险评估