医药探秘｜重组胶原蛋白的“照妖镜”：肽段覆盖率

重组胶原蛋白是利用基因工程技术，通过将人胶原蛋白的基因编码序列转入到特定的宿主细胞（如酵母、大肠杆菌等）中，让这些细胞像“微型工厂”一样，批量生产出具有特定功能的胶原蛋白。随着国家药监局《重组胶原蛋白》行业标准（如YY/T 1849-2022，YY/T 1888-2023）的出台，对重组胶原蛋白的鉴别、纯度等都有了硬性要求。肽段覆盖率作为胶原蛋白鉴别的重要手段，是企业合规上市、产品备案注册的强制性要求和必做项目。

 

一、肽段覆盖率实验剖析

肽段覆盖率实验是对胶原蛋白进行“鉴定”的金标准。它通过对胶原蛋白进行酶切实验，将复杂的蛋白质大分子分解成较小的多肽片段，经过质谱鉴定后与其理论氨基酸序列进行比对，从而完成百分百的序列确认和质量核查。

 

 

01. 酶切——精准的“手术刀”

酶切的目的将完整的长链胶原蛋白分子，切割成大小适中、便于分析的小片段（肽段）。
实验过程会使用如胰蛋白酶，糜蛋白酶等特异的蛋白酶，如胰蛋白酶会在蛋白的K,R氨基酸的N端特异性的切割蛋白,以得到酶切后的多肽片段。

 

02. 色谱分离与质谱检测

酶切后的混合肽段经过色谱柱进行分离，然后在质谱中进行检测，质谱会精确测量每个肽段的分子量，并将其进一步打碎读取其内部结构信息，生成唯一的“指纹图谱”。

 

 

03. 数据分析

数据分析软件会根据实验使用的酶预测理论肽段，并计算出这些肽段的理论分子量和离子的碎裂图谱，将实测得到的成千上万张质谱图，与理论预测的进行自动比对搜索识别，确认哪些实测肽段成功匹配上了理论肽段，并检测肽段中发生的翻译后修饰（如：氧化，脱酰胺等）。若肽段覆盖率达到百分之百，说明测试的胶原蛋白序列与理论设计一致。
肽段覆盖率之所以能成为行业金标准，就在于它从“序列”这一根本层面上进行了验证，其科学性和严谨性远非简单的含量测定等方法可比，实现了对重组胶原蛋白最直接、最权威的鉴定。

二、我们的优势

肽段覆盖率检测需要样本纯度足够高，而对于像凝胶敷料等复杂制剂，挑战极大。产品中的增稠剂、防腐剂、其他功效成分等都会对分析造成严重干扰，许多实验因此无法获得准确的数据，甚至根本无法检测。华测医药基于多元化的项目经验，已建立了一套成熟、稳定且高效的复杂样品前处理方案，确保检测结果的可靠性。

 

某凝胶产品的肽段覆盖率分析

 

此外，华测医药胶原蛋白理化实验室已获得CNAS资质认证，无论是胶原蛋白原料或者成品制剂，都可提供分析方案，助力您的产品申报上市。

 

参考文献：

1、YY/T 1888-2023 重组人源化胶原蛋白

2、YY/T 1849-2022 重组胶原蛋白