药学CMC视角丨滴眼剂一致性评价启动，别忘了亚硝胺研究！

2026年9月2日，第86号公告落地，滴眼剂一致性评价的闸门正式开启。逆向工程处方解析成为行业热词，参比制剂Q1/Q2的破解之战已然打响。药学CMC视角丨滴眼剂一致性评价启动，华测医药逆向工程技术助力处方解析然而，在这场与时间赛跑的竞赛中，有一个极易被忽视的“暗礁”——亚硝胺杂质研究。CDE审评中心文章已明确点名左氧氟沙星滴眼液、盐酸莫西沙星滴眼液等品种需开展相关研究，你是否还停留在“等发补再说”的阶段？

 

一、法规及政策要求

CDE在《溶液型滴眼剂仿制药研发和评价的一般考虑》一文中明确指出：亚硝胺杂质是近年来杂质研究关注的重点。文章特别提到，左氧氟沙星滴眼液、盐酸莫西沙星滴眼液等品种，应参考《化学药物中亚硝胺类杂质研究技术指导原则（试行）》对相关的亚硝胺杂质进行研究。

CDE对某滴眼液品种的发补意见亦强调：应参考FDA、EMA等监管机构发布的亚硝胺杂质技术要求及清单，对含有仲胺及叔胺结构的API进行风险评估，采用高灵敏度检测方法进行研究，特别关注检测方法的耐用性，结合多批次样品及稳定性数据制定合理控制策略。

以左氧氟沙星为例，其化学结构中的N-甲基哌嗪环（叔胺位点）在特定条件下可能存在亚硝化风险，可转化为N-亚硝基去甲基左氧氟沙星等杂质，需纳入评估与控制范畴。

 

左氧氟沙星

N-亚硝基去甲基左氧氟沙星

 

二、分析方法开发与验证：方法学的系统构建

在经过亚硝胺风险评估和明确目标杂质后，方法开发的核心任务是建立高灵敏度、高特异性的LC-MS/MS定量方法。滴眼液基质复杂，辅料种类多，目标杂质含量低至PPB级别，这些都给方法开发带来了挑战。

方法开发的关键考量：

• 不同亚硝胺杂质物理化学性质各异，需优化色谱条件以实现良好保留与分离；

• 限度在PPB级别，对仪器灵敏度要求极高；

• NDSRI杂质与主成分结构相似，且可能存在异构体，需通过色谱分离与质谱参数双重优化加以甄别；

• 滴眼液中辅料（如增稠剂、表面活性剂）可能引起基质效应，需系统评估并予以校正。

华测医药采用AB Sciex 5500、Agilent 6475和Agilent 6530等液质联用设备，按照中国药典2025年版四部通则<9101>分析方法验证指导原则，对方法的专属性、系统适用性、线性与范围、准确度、精密度（重复性/中间精密度）、溶液稳定性、检测限与定量限、耐用性等参数进行系统验证，确保数据真实、可溯源，可直接用于注册申报。

 

华测医药配备安捷伦6475 LC/TQ

 

典型杂质研究图谱：

以某喹诺酮类滴眼液NDSRI杂质方法开发为例，下图展示了目标杂质在滴眼液基质中的检测色谱图。采用加标方式考察基质对定量的影响，在该品种的滴眼液基质中，方法专属性良好，能够满足PPB级别杂质的准确定量需求。

 

图1. 某喹诺酮滴眼液中代表性亚硝胺杂质加标样品检测色谱图

 

华测医药已在多个滴眼液品种中完成了亚硝胺杂质的分析方法开发与验证，积累了覆盖多种杂质类型的系统研究经验：

• 喹诺酮类滴眼液NDSRI杂质：针对API结构中的N-甲基哌嗪环（叔胺位点）的亚硝胺杂质，完成了色谱方法开发与质谱参数优化，实现了在滴眼液基质中对NDSRI的准确定量。
        • 含伯胺/仲胺/叔胺结构的滴眼液品种：针对NDMA、NDEA、NPIP、NDBA等常见小分子亚硝胺，建立了专属的LC-MS/MS方法，考察了不同色谱柱及流动相体系对分离度的影响，确保杂质与基质峰的良好分离。
        • 高分子辅料基质中的痕量亚硝胺检测：针对含有玻璃酸钠、聚乙烯醇等高分子辅料的滴眼液，通过前处理步骤优化与内标校正，有效消除了基质效应干扰。

以上各类杂质的分析方法，均经过完整规范的方法学验证，分析结果直接服务于客户品种的亚硝胺风险评估与控制策略制定，为药品注册申报或补充申请提供坚实的技术支撑。

 

三、总结

滴眼剂一致性评价已正式启动，亚硝胺杂质研究不再是可选项。对于含有伯胺、仲胺或季铵盐结构的API，建议尽早启动亚硝化风险评估。科学的路径应当是：先通过风险评估明确目标杂质，再针对监管关注的杂质建立高灵敏度LC-MS/MS方法，形成科学、高效且合规的控制策略。

华测医药依托专业的合成与质谱技术平台，致力于为客户提供从“潜在风险识别”到“方法开发验证”的一体化亚硝胺解决方案。如您正在筹备滴眼剂或其他剂型的一致性评价工作，欢迎联系ag真人平台官方！

 

参考文献：[1] 王家强,李珊珊,谢琰,等.溶液型滴眼剂仿制药研发和评价的一般考虑[J].中国医药工业杂志, 2025, 56(1):125-129.