药学CMC视角丨华测医药SEC-MALS技术平台：多品类大分子精准表征与质量控制

生物药的分子量、聚集状态、构象与分子尺寸直接影响有效性与安全性。传统SEC依赖标准品和保留时间，易受构象差异、固定相吸附、稀释效应及UV消光系数不同影响，导致分子量误判与聚集体定量偏差。SEC-MALS作为正交表征方法，已纳入2025年版《中国药典》相关通则，并被FDA、EMA及CDE等监管机构在相关指南中列为推荐的正交方法之一。MALS无需分子量标准品校准，可直接测定绝对分子量、回转半径、聚集体、纯度、构象及支化结构等关键质量属性。

华测医药引进怀雅特DAWN多角度激光光散射检测器与Optilab示差折光检测器联用系统，建立符合NMPA申报要求的SEC-MALS技术服务平台，为抗体、基因治疗、疫苗、核酸、高分子辅料及纳米制剂提供关键表征能力。

 

 

一、国际一流设备，多检测器联用全覆盖

本实验室SEC-MALS系统集成SEC分离与多检测器检测：

多角度激光光散射（MALS）：18角度静态光散射，无需分子量标准品或色谱柱校准，直接测定绝对分子量（Mw）、均方根回转半径（Rg）及构象信息，适用于蛋白、多肽、核酸、聚合物及纳米颗粒。

示差折光浓度检测器（RI）：实时浓度信号，对无紫外吸收的多糖、PEG、脂质体等辅料大分子尤为适用。

分子排阻色谱（SEC）：按流体力学体积分离，与MALS/RI串联，ASTRA软件同步采集，一次进样获取分子量分布、聚集体含量、纯度及分子尺寸等多维数据。

 

二、核心服务内容：覆盖生物药全品类表征需求

 

服务类别	服务内容
分子量测定	绝对分子量（MW）测定、分子量分布与均一性分析。
纯度及聚集体研究	单体纯度、二聚体/寡聚体/高分子量聚集体（HMW）及低分子量片段（LMW）定量。
构象与分子尺寸	均方根回转半径（Rg）、构象图分析，辅助判断球状、无规线团或棒状；支化结构与支化比评估。

应用领域涵盖：

• 蛋白与抗体类：多肽、抗体、ADC、融合蛋白等绝对分子量、聚集体与构象分析。
• 核酸与基因治疗：mRNA、AAV载体、溶瘤病毒等分子量分布、聚集体与纯度评价。
• 生物疫苗类：重组亚单位疫苗、VLP等结构完整性、组装均一性与聚集体分析。
• 高分子辅料：PEG衍生物、PLGA、胶原蛋白等绝对分子量、构象与支化评价。
• 纳米药物递送系统：脂质体、LNP等分子尺寸与聚集状态表征。

 

三、应用案例：解决实际研发与质控难题

案例1：重组胶原蛋白绝对分子量检测

分子量及分布是胶原蛋白核心质量属性。SEC-MALS直接测定各组分绝对分子量，无需标准品，清晰呈现主峰及高分子量聚集体分布，降低传统SEC因构象差异导致误判风险。重组Ⅲ型人源化胶原蛋白分子量测定结果：Peak1约4.5×10⁴，Peak2约9.7×10⁴，Peak3约2.2×10⁴，技术重复RSD均较低。

 

图1. 重组Ⅲ型人源化胶原蛋白SEC-MALS与MALDI TOF结果对比（CUI Xinling et al.2024）

 

案例2：不同透明质酸钠产品分子量与构象对比

SEC-MALS对比三种透明质酸钠，构象图（Rg vs. Mw）斜率均约0.6，表明呈柔性线团构象；其中一种在低分子量端偏离线性，提示少量支化结构或弱相互作用。该技术可同步获取分子量与构象，为产品一致性和工艺评价提供依据。

 

图2. 不同透明质酸钠产品分子量与构象对比（Waters内部数据）

 

案例3：寨卡病毒NS5蛋白聚集体与单体分布

不同缓冲液条件下，SEC-MALS可明确区分NS5蛋白单体与不同聚集态，计算各组分质量百分比及分子量均一性，为制剂缓冲体系筛选提供依据，快速确定抑制聚集的最适条件。

 

图3. 不同缓冲液下寨卡病毒NS5蛋白聚集体检测结果（Diego S. Ferrero et al. 2019）

 

四、结语

华测医药SEC-MALS技术平台，依托国际一流设备、资深专家团队及符合申报要求的质量管理体系，为生物医药企业提供专业、可靠的SEC-MALS表征服务。若您在抗体、基因治疗、多肽、核酸、疫苗、高分子辅料或纳米药物研发中遇到绝对分子量、聚集体、构象与支化评价等需求，欢迎联系ag真人平台官方。